霍亂弧菌01型核酸檢測(cè)試劑盒

廣州健侖生物科技有限公司

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1.菌懸液?jiǎn)苽?br />1）攞培養(yǎng)24個(gè)鐘嘅酵母菌嘅斜面一支，用無(wú)菌生理鹽水將菌苔洗下，并倒入裝有玻璃珠嘅大試管中，振蕩半個(gè)鐘，以打碎吖菌蚊。
2）將上述菌液離心（1500r/min，離心五分鐘），棄去上清液，將菌體用無(wú)菌生理鹽水洗滌2—三次，zui后做菌懸液。
3）用顯微鏡直接計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)，較細(xì)胞濃度為每毫升108個(gè)。
2.薯仔瓊脂培養(yǎng)基融化后，凍到55℃左右時(shí)又平板，凝固后待用。
3.紫外線處理
1）將紫外線燈掣打開(kāi)預(yù)熱約四個(gè)字。
2）攞直徑9cm無(wú)菌平皿一套，分別就加上述菌懸液6－7ml，并放入無(wú)菌大頭針于平皿中。
3）將裝有菌懸液?jiǎn)?平皿置于磁力攪拌器上，喺隔為30cm，功率為15W嘅紫外線燈下分別就攪拌照射30s，60s，90s，120s，150s，180s。
4.稀釋喺燈下，將上述經(jīng)誘變處理嘅菌懸液以10倍稀釋法稀釋成10-1-10-6（具體可按預(yù)嘅存活率進(jìn)行稀釋?zhuān)?br />5.扠平板羅10-5、10-6、10-7三個(gè)稀釋度扠平板，個(gè)個(gè)稀釋度扠平板三只，每只平板加稀釋菌液0.1ml，用無(wú)菌玻璃返正扠勻。以同樣用，攞未經(jīng)紫外線處理嘅菌稀釋液扠平板作對(duì)照。
6.培養(yǎng)
將上述扠勻嘅平板，靜置2min后，用黑布（或者黑紙）包好，置36℃、42℃、五十℃三個(gè)唔同溫度下培養(yǎng)24個(gè)鐘。注意個(gè)個(gè)平皿背面要表明處理時(shí)間同稀釋度。
7.計(jì)數(shù)將培養(yǎng)24個(gè)鐘后嘅平板拎出進(jìn)行計(jì)數(shù)，根據(jù)對(duì)照平板上菌落數(shù)，計(jì)算
1）唔同溫度下菌嘅存活率
2）唔同紫外線處理時(shí)間菌嘅存活率
3）同溫度下稀釋倍數(shù)嘅準(zhǔn)確性

1 .菌懸液の製備
いち）を育成の24時(shí)間の酵母菌の斜面いち本用無(wú)菌生理食塩水を洗って菌苔、それを盛ガラス玉の大管瓶の中、振動(dòng)さんじゅう分を砕いて菌ブロック。
に）の上述の菌液遠(yuǎn)心（1500r / min、遠(yuǎn)心ご分）、捨てに上澄み液は、菌體用無(wú)菌生理食塩水洗浄にーさん、zui後で菌懸濁液。
3）顕微鏡で、直接計(jì)算法をカウントし、細(xì)胞濃度を1ミリリットルあたり108個(gè)に調(diào)整する。
2 .ジャガイモの寒天育成基が溶けた後に、寒くて55℃ぐらいの時(shí)は平板で、固まった後に使います。
3 .紫外線処理
1）紫外線ランプのスイッチを約20分ほど開(kāi)けます。
に）を直徑9無(wú)菌シャーレいちセット、加入する上記菌懸濁液6－7mlを入れ、無(wú)菌ピン于平シャーレで。
さん）が菌を盛懸濁液のいちシャーレをマグネチックスターラーに、距離を30 cm、電力を15W紫外線照射燈の下にそれぞれ攪拌30秒以?xún)?nèi)、60s、90s、120s、150s、180s。
よんしよ.希釈に赤信號(hào)では、上記の経誘變処理の菌懸濁液をじゅう倍希釈法は希釈10-1-10-6（具體的に推定の生存率を希釈）。
ご.塗りを10-5、薄型10-6、3つの希釈度塗り板- 7であって、すべての希釈度塗り薄型さんだけ、どの薄型加希釈液0.1ml菌、用無(wú)菌ガラススパチュラ均等に塗る。同様の操作で、紫外線処理を受けていない菌希釈液をとり、平板に塗布する。
6 .
上述の均等に塗るの薄型、靜置2min後、黒い布（または黒紙）に包んで、置36℃、42℃で、3つの異なるごじゅう℃溫度を24時(shí)間。すべての平皿の裏には処理時(shí)間と希釈度が表示されるように気をつけます。
7 .數(shù)は、24時(shí)間後のタブレットから抽出してカウントを行う。
1）異なる溫度下菌の生存率
2）紫外線処理時(shí)間菌の生存率
3）同じ溫度で倍數(shù)の正確性を希釈する